TSK-GEL 離子交換色譜柱
TOSOH 提供了一系列用離子交換方式進(jìn)行分析和分離生物分子的液相色譜柱.在任何一種離子交換模式既有甲基丙烯酸酯也有硅膠基的色譜柱。蛋白質(zhì)、多肽、DNA和、核苷酸衍生出來的RNA 以及其他核酸片斷都是TSK-GEL陰離子交換色譜柱分析分離的典型樣品?；诰郾揭蚁┗w材料的陰離子交換柱適合用于小分子量的糖類氨基酸、核酸堿基及小分子的備選。
特性 , 優(yōu)點(diǎn)
新型 BioAssit 色譜柱
l 即使對(duì)較大的蛋白質(zhì)也具有高容量>100KD,
l 取得相同樣品量的流動(dòng)相耗量小
l 具有能提供快速傳輸?shù)目捉Y(jié)構(gòu) , 更加尖銳的峰形了分析和分離
l 硬件為具有生物相容性的PEEK 柱 , 由于吸附產(chǎn)生的樣品損失較小
聚合物基的離子交換色譜柱
l 甲基丙烯酸酯骨架化學(xué)穩(wěn)定性（pH2-12）
l 較大的孔尺寸 （1000A） 排出的蛋白質(zhì)限為5000，000Da
l 無孔樹脂基體柱（(NPR)
l 機(jī)械性能穩(wěn)定
l 耐堿、溶劑、改性劑表面劑重復(fù)清洗
l 對(duì)大多數(shù)生物聚合物使用相同住
l 快速QC 分析和工藝監(jiān)測(cè)
l 降低溶劑消耗和 分析時(shí)間
硅膠基體的離子交換色譜柱
較小的孔尺寸2SW =125? 3SW=250? 適合 分析 較小的分子量的樣品如核苷、備選、兒茶酚、小肽。
TSK –GEL 陰離子交換色譜柱
l 填充了多孔結(jié)構(gòu)和化學(xué)鍵合的樹脂TSK gel BIoAssist Q 柱 對(duì)分子量大小不同的蛋白質(zhì)和核酸具有高交換容量。
l TSK-GEL DNA –NPR 柱可用于 PCR 片段的分析
l TSK-gel SuperQ－5pw 柱由于采用了 新的鍵合化學(xué)技術(shù)，所以比TSK-gel DEAE -5pw柱有更高的交換容量 。
TSK-GEL陽離子交換色譜柱
l TSK gel BIoAssist S 對(duì)中等和大分子量的蛋白質(zhì)具有高度交換容量
l 因小孔徑和大比表面積TSK gelDEAE-2SW 與小分子和中等分子的蛋白質(zhì)結(jié)合能力高于5pw 兩倍。
TSK 離子交換柱選擇
樣品類型 | 分子量范圍（Da） | Tsk-gel 柱 | pH范圍 |
氨基酸 多肽和蛋白 | |||
氨基酸 | < 2000 | SAX SCX | 1-14 1-14 |
肽和小蛋白 | <10000 | SCX SP-2SW CM-2SW DEAE-2SW QAE-2SW | 1-14 2-7.5 2-7.5 2-7.5 2-7.5 |
多肽和小蛋白 | 30000 | CM-3SW DEAE-3SW | 2-7.5 2-7.5 |
蛋白 | >1 | BioAssist S BioAssist Q SP-5PW DEAE-5pw CM-5PW
| 2-12 |
核酸 | |||
嘌呤和嘧啶 | DEAE-2SW SP-2SW | 2-7.5 2-7.5 | |
核苷 | SP-2SW DEAE-2SW | 2-7.5 2-7.5 | |
核苷酸 | DEAE-2SW | 2-7.5 | |
寡聚核苷酸 | DEAE-5PW DEAE-NPR DNA-NPR SUPERQ-5PW | 2-12 2-12 2-12 2-12 | |
DNA RNA和PCR產(chǎn)品 | DNA-NPR DEAE-NPR DEAE-5PW DEAE-3SW | 2-12 2-12 2-12 2-7.5 | |
其它分子 | |||
單雙糖 | Sugar AX1 ,AXG SCX SAX | 1-14 1-14 1-14 | |
酸 | OAPAK-A | 2-12 | |
下面是國(guó)內(nèi)常用的離子交換色譜柱的應(yīng)用實(shí)例
下圖是用陰離子離子交換色譜柱 TSK-GEL SUGAR AXG預(yù)柱反應(yīng)后測(cè)定各類糖類纖維二糖、麥芽糖、乳糖、鼠李糖、來蘇糖、核糖、甘露糖、海藻糖、糖、半乳糖、木糖等
Sample: | 糖的標(biāo)準(zhǔn)品 |
Compound: | 1) Cellobiose, 2) Maltose, 3) Lactose, 4) Rhamnose, 5) Lyxose, 6) Ribose, 7) Mannose, 8) Fucose, 9) Arabinose, 10) Galactose, 11) Xylose, 12) Glucose |
Chromatographic conditions |
Column(s)[Column, Cat.No., Dimension, Particle Size, Number]: |
1) TSKgel Sugar AXG, 8640, 4.6*150(mmI.D.*mm), (um), 1 | |
Mobile Phase: A: 0.6 mol/l borate buffer (pH 7.7)B: 0.7 mol/l borate buffer (pH 7.25) | |
Temperature:70C | |
Detection:1) FS : ex.: 331 nm em.: 383nm | |
Injection vol:20ul | |
Sample load:Each of monosaccharide: 25 umol/lumol/l, disaccharide: 50umol/l | |
Note:Post column reactionReaction reagent: 2.5% 2-Cyanoacetamide solution | |
Source/reference:TOSOH Separation Report Vol.: No.: 42 p:7 - 7(2) ( ) | |
Title:Separation of saccharides on TSKgel Sugar AXG | |
下面的譜圖是采用OAPAK離子排除色譜柱，用離子排除色譜 和不同的檢測(cè)器，測(cè)定各種酸 酸、酒石酸、檸檬酸、蘋果酸、焦谷氨酸 、乳酸、醋酸、丁二酸 |
Sample: | 酸標(biāo)準(zhǔn)品 |
Compound: | 1) Pyruvic acid, 2) Tartaric acid, 3) Citric acid, 4) Malic acid, 5) Pyroglutamic acid, 6) Lactic acid, 7) Acetic acid, 8) Succinic acid |
Chromatographic conditions |
Column(s)[Column, Cat.No., Dimension, Particle Size, Number]: |
| 1) TSKgel OApak-P, 16654, 6.0*40(mmI.D.*mm), (um), 1 |
| 2) TSKgel OApak-A, 16653, 7.8*300(mmI.D.*mm), (um), 2 |
Mobile Phase: | 0.75 mM sulfuric acid |
Flow rate: | 0.8ml/min |
Temperature: | 60C |
Detection: | 1) CM 2) UV/VIS : 210nm 3) UV/VIS : 450nm |
Injection vol: | 20ul |
Sample load: | 1) 50ppm, 2) 500ppm, 3) 500ppm, 4) 500ppm, 5) 500ppm, 6) 1000ppm, 7) 2000ppm, 8) 1000ppm |
Note: | Peak 4': Degradation product of malic acid |
