隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲的檢測
“GB/T5750.12-2006和US-EPA Methods 162/1623”
EPA1623（GB/T5750.12-2006）兩蟲檢測方法的操作簡介：
“EPA1623方法”是由美國局制定的用于測定水中隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲的標(biāo)準(zhǔn)方法。概括地說,該方法分為三部。，對水樣進行過濾收集水中的卵囊和孢囊；第二，利用免疫磁分離來純化過濾樣品；第三，對純化的樣品通過免疫熒光顯微鏡法來檢測“兩蟲”的數(shù)量。
1．水樣過濾:
采用美國EPA和國標(biāo)5750中推薦的Envirochek囊式濾器對水樣進行過濾，將卵囊、孢囊及其他物質(zhì)收集在過濾器上。該過濾器可用于實驗室批量水樣的過濾，也可以用于野外現(xiàn)場水樣的過濾。過濾后的囊式濾器，用洗脫劑將攔截在濾囊上的顆粒物質(zhì)震蕩洗脫下來，并將洗脫物收集在一個250毫升的離心管中。
2．免疫磁分離：
離心管中的洗脫物通過離心分離作用，使顆粒物沉淀在離心管底部，同時去掉離心管中的上清液。
將離心后含有卵囊和孢囊的沉淀物用純水混勻，并向其中加入的免疫磁分離試劑進行磁分離。具體做法是：先用帶有體（隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲）的磁珠捕獲沉淀物中的卵囊和孢囊；其次通過磁粒濃縮器將捕獲有卵囊和孢囊的磁珠吸附在試管壁上，去掉未被吸附在試管壁上含雜質(zhì)的液體，以卵囊和孢囊從沉淀物中分離出來的目的；再次加入鹽酸將管壁上捕獲有卵囊和孢囊的磁珠進行洗滌，以使卵囊和孢囊從磁珠上解離出來；后將含有卵囊和孢囊的純化液轉(zhuǎn)移至井形載玻片上進行制片。
3.IFA 染色&鏡檢：
待井形載玻片上的純化液干后，用NaOH中和井形載玻片上樣品，再用免疫熒光染色試劑盒，將卵囊和孢囊在井形載玻片上用磁熒光標(biāo)記的單克隆體和DAPI溶液著色后，蓋上蓋玻片。然后用正置熒光和顯微鏡對著色樣本進行檢測。觀察樣片，對合卵囊和孢囊大小、外形、熒光特性的對象進行定性、定量分析。
兩蟲檢測中Envirochek囊式過濾器介紹：
水樣過濾采用圖2所示的方式將囊式濾器安裝好，過濾完的濾囊用圖4所示的多臂震蕩器進行洗脫分離。
特點及優(yōu)點:
EPA1623方法推薦產(chǎn)品；國標(biāo)5750方法1。
1um孔徑的改良濾膜能100%截留兩蟲。
性使用的一對一設(shè)計避免了因其它因素的污染而造成的實驗結(jié)果誤差。
簡單的安裝與拆卸省時省物，并且可以現(xiàn)場采樣、異地檢測。
配合多臂洗脫震蕩器，實現(xiàn)多樣品檢測，大大節(jié)省人力和時間。
于源水（50升）與自來水（1000升）的隱孢子蟲與賈第鞭毛蟲的濃縮與回收，使用簡單、方便、快捷，自動化程度高。
隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲的純化
—免疫磁分離技術(shù)—
1999年美國署在EPA1623方法中規(guī)定利用IMS(Immuo Magnetic Separation)免疫磁分離技術(shù)Dynabeads攀分選檢測飲用水中隱孢子蟲卵囊和賈第鞭毛蟲孢囊，其原理是：利用帶有特異性體的磁珠與樣品中的目標(biāo)產(chǎn)物G/C特異性原相結(jié)合，在磁場中選擇性分離。
研究型正置熒光生物顯微鏡系統(tǒng)：
本實驗中所配備的熒光生物顯微鏡可以很好地完成明場和暗場顯微觀察，具有良好的性、穩(wěn)定性和實驗室廣泛應(yīng)用等特性。
顯微鏡數(shù)碼照相部分所配備的數(shù)碼照相機，為應(yīng)用的高清晰度數(shù)碼相機，采用不同于民用的圖像數(shù)據(jù)采集體及系統(tǒng)，此款相機成像可1200萬像素級別，并且在適用明場拍攝的同時可以、穩(wěn)定地完成熒光圖象、暗場等拍攝的要求，對實驗圖像數(shù)據(jù)的記錄、再現(xiàn)和分析提供了很好的可能和保障；該相機的相關(guān)系統(tǒng)是目前應(yīng)用比較普遍、性能比較的；如出現(xiàn)問題也方便修理和更換配件。配備微機及彩色打印系統(tǒng)效果。
“GB/T5750.12-2006和US-EPA Methods 162/1623”
EPA1623（GB/T5750.12-2006）兩蟲檢測方法的操作簡介：
“EPA1623方法”是由美國局制定的用于測定水中隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲的標(biāo)準(zhǔn)方法。概括地說,該方法分為三部。，對水樣進行過濾收集水中的卵囊和孢囊；第二，利用免疫磁分離來純化過濾樣品；第三，對純化的樣品通過免疫熒光顯微鏡法來檢測“兩蟲”的數(shù)量。
1．水樣過濾:
采用美國EPA和國標(biāo)5750中推薦的Envirochek囊式濾器對水樣進行過濾，將卵囊、孢囊及其他物質(zhì)收集在過濾器上。該過濾器可用于實驗室批量水樣的過濾，也可以用于野外現(xiàn)場水樣的過濾。過濾后的囊式濾器，用洗脫劑將攔截在濾囊上的顆粒物質(zhì)震蕩洗脫下來，并將洗脫物收集在一個250毫升的離心管中。
2．免疫磁分離：
離心管中的洗脫物通過離心分離作用，使顆粒物沉淀在離心管底部，同時去掉離心管中的上清液。
將離心后含有卵囊和孢囊的沉淀物用純水混勻，并向其中加入的免疫磁分離試劑進行磁分離。具體做法是：先用帶有體（隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲）的磁珠捕獲沉淀物中的卵囊和孢囊；其次通過磁粒濃縮器將捕獲有卵囊和孢囊的磁珠吸附在試管壁上，去掉未被吸附在試管壁上含雜質(zhì)的液體，以卵囊和孢囊從沉淀物中分離出來的目的；再次加入鹽酸將管壁上捕獲有卵囊和孢囊的磁珠進行洗滌，以使卵囊和孢囊從磁珠上解離出來；后將含有卵囊和孢囊的純化液轉(zhuǎn)移至井形載玻片上進行制片。
3.IFA 染色&鏡檢：
待井形載玻片上的純化液干后，用NaOH中和井形載玻片上樣品，再用免疫熒光染色試劑盒，將卵囊和孢囊在井形載玻片上用磁熒光標(biāo)記的單克隆體和DAPI溶液著色后，蓋上蓋玻片。然后用正置熒光和顯微鏡對著色樣本進行檢測。觀察樣片，對合卵囊和孢囊大小、外形、熒光特性的對象進行定性、定量分析。
兩蟲檢測中Envirochek囊式過濾器介紹：
水樣過濾采用圖2所示的方式將囊式濾器安裝好，過濾完的濾囊用圖4所示的多臂震蕩器進行洗脫分離。
特點及優(yōu)點:
EPA1623方法推薦產(chǎn)品；國標(biāo)5750方法1。
1um孔徑的改良濾膜能100%截留兩蟲。
性使用的一對一設(shè)計避免了因其它因素的污染而造成的實驗結(jié)果誤差。
簡單的安裝與拆卸省時省物，并且可以現(xiàn)場采樣、異地檢測。
配合多臂洗脫震蕩器，實現(xiàn)多樣品檢測，大大節(jié)省人力和時間。
于源水（50升）與自來水（1000升）的隱孢子蟲與賈第鞭毛蟲的濃縮與回收，使用簡單、方便、快捷，自動化程度高。
隱孢子蟲和賈第鞭毛蟲的純化
—免疫磁分離技術(shù)—
1999年美國署在EPA1623方法中規(guī)定利用IMS(Immuo Magnetic Separation)免疫磁分離技術(shù)Dynabeads攀分選檢測飲用水中隱孢子蟲卵囊和賈第鞭毛蟲孢囊，其原理是：利用帶有特異性體的磁珠與樣品中的目標(biāo)產(chǎn)物G/C特異性原相結(jié)合，在磁場中選擇性分離。
研究型正置熒光生物顯微鏡系統(tǒng)：
本實驗中所配備的熒光生物顯微鏡可以很好地完成明場和暗場顯微觀察，具有良好的性、穩(wěn)定性和實驗室廣泛應(yīng)用等特性。
顯微鏡數(shù)碼照相部分所配備的數(shù)碼照相機，為應(yīng)用的高清晰度數(shù)碼相機，采用不同于民用的圖像數(shù)據(jù)采集體及系統(tǒng)，此款相機成像可1200萬像素級別，并且在適用明場拍攝的同時可以、穩(wěn)定地完成熒光圖象、暗場等拍攝的要求，對實驗圖像數(shù)據(jù)的記錄、再現(xiàn)和分析提供了很好的可能和保障；該相機的相關(guān)系統(tǒng)是目前應(yīng)用比較普遍、性能比較的；如出現(xiàn)問題也方便修理和更換配件。配備微機及彩色打印系統(tǒng)效果。
