- 技術(shù)參數(shù)
參數(shù) 測定 指標(biāo)
靈敏度:MS 模式 1 pg ,(M+H)+ m/z 609.2807;
LC/MS 400 µL/min LC/MS 400 µL/min 10:1 RMS
靈敏度: MS/MS模式 1 pg(174, 195,397,448 m/z);
LC/MS 400 µL/min 50:1 RMS (tical 200:1 RMS)
靈敏度:MS模式
Nanoflow ChipMS,
300 nL/min 500 attomole of BSA peptide
digest (200 attomole- tical) 15% coverage in protein database
search (PMF)
靈敏度:MS/MS 模式
Nanoflow ChipMS,
300 nL/min 100 fmol/ul Glu-fib peptide 50:1 RMS
分辨率 >20,000FWHM
質(zhì)量準(zhǔn)確度:MS模式 (M+H)+ (m/z 609.2807)
20 pg LC/MS,400 µL/min <2 ppm
質(zhì)量準(zhǔn)確度:MS/MS 模式 m/z 609?397 20 pg
LC/MS, 400 µL/min <5 ppm
質(zhì)量準(zhǔn)確度:MS模式
Infusion using nanoflow
ChipMS 300 nL/min Glu-fib peptide (M+2H)++ (m/z 785.83) <2 ppm
質(zhì)量準(zhǔn)確度:MS/MS 模式
Infusion using nanoflow
ChipMS 300 nL/min Glu-fib peptide, m/z
785.83 ----> 684.35/480.26 <5 ppm
譜內(nèi)動態(tài)范圍 105
質(zhì)量范圍 m/z 25 – 20,000
光譜采集速率:MS模式 20 spectra/second
光譜采集速率:MS/MS模式 10 MS/MS spectra/second
主要特點(diǎn) 儀器主要特點(diǎn):
1. 靈敏度
• 流離子聚焦離子化技術(shù),在霧化溫度的同時,了電場密度,使離子化效率得以顯著,并屏蔽基質(zhì)干擾;此外,在鞘氣流的作用下,離子云密度明顯增加(離子聚焦),進(jìn)而質(zhì)譜取樣效率;這些技術(shù)的進(jìn)步,從離子生成和傳輸過程了質(zhì)譜檢測的靈敏度;同時,該離子源可在0.1~2.5mL/min的流速下操作,使其應(yīng)用范圍進(jìn)一步擴(kuò)大;
• 芯片液相色譜技術(shù),安捷倫的,業(yè)內(nèi)的納流液相色譜。將納流分離與電噴霧離子化過程合二為一,消除管線連接等因素造成的柱外體積擴(kuò)散;同時,在芯片上可以同時完成樣品的富集、純化和分離,了微量樣品的進(jìn)樣以及痕量成分的高靈敏分離分析;
• 經(jīng)惰性處理的鍍白金離子傳輸毛細(xì)管,消除電荷蓄積作用,同時在性切換過程中不損失離子;安捷倫的RF離子透鏡顯著高質(zhì)量端的離子傳輸;真空系統(tǒng)了離子平均自由程,將離子在傳輸過程中的損耗降;上述技術(shù)的綜合運(yùn)用,了離子傳輸效率的化,從而顯著靈敏度;
• 采用高頻、小口徑八桿,更地聚焦離子成束,有助于MS/MS的高靈敏的采集;
• 采用線性加速的碰撞六桿反應(yīng)池,消除背景噪音和“記憶效應(yīng)”,從而了痕量樣品快速、準(zhǔn)確的分析結(jié)果。
2. 準(zhǔn)確度
• 精良的溫度控制:安捷倫QTOF系列產(chǎn)品采用真空夾套雙層飛行管設(shè)計(jì),并使用目前世界上熱膨脹系數(shù)的合金材料制造,了外部環(huán)境溫度變化對飛行管道的影響;此外,高壓元件,均有嚴(yán)格的溫度控制和屏蔽系統(tǒng),進(jìn)而從儀器內(nèi)部消除了溫度波動的干擾;因此,安捷倫QTOF系列產(chǎn)品可以在常規(guī)環(huán)境下,保持質(zhì)量軸的穩(wěn)定性,顯著方便了儀器的使用和維護(hù);
• 自動調(diào)諧:配合調(diào)諧溶液自動輸送系統(tǒng),軟件控制的自動調(diào)諧,操作簡便,無需其它裝置或手工操作;多種調(diào)諧模式,儀器穩(wěn)定、準(zhǔn)確的狀態(tài);
• 同步實(shí)時校正:在液相色譜液流輸入的同時,參比離子經(jīng)虹吸管路揮發(fā)進(jìn)入流離子聚焦離子源或芯片液相色譜離子源,不干擾待測成分的離子化過程,但可以和樣品離子同時進(jìn)入質(zhì)譜系統(tǒng)得到檢測,從而完成實(shí)時參比校正。
3. 采樣速率、動態(tài)范圍和質(zhì)譜分辨率
• 信號處理采用模數(shù)轉(zhuǎn)換器(ADC): 帶雙增益微處理器的ADC消除了TDC所固有的信號飽和、響應(yīng)時間等缺陷,無需進(jìn)行信號預(yù)衰減,即可準(zhǔn)確記錄實(shí)時的、實(shí)際的離子強(qiáng)度,無信號丟失可能,從而105的譜內(nèi)動態(tài)范圍。這樣,進(jìn)樣分析,就可以準(zhǔn)確測定樣品中,具有顯著濃度差異的各個成分;同時,使得用MS和MS/MS數(shù)據(jù)進(jìn)行定量分析成為可行;
• 6530 QTOFMS 采用的4GHz ADC,每0.25ns采集信號強(qiáng)度,從而更精密地記錄離子到達(dá)檢測器產(chǎn)生的信號,并由此質(zhì)譜分辨率,尤其對低質(zhì)量端的分辨率的更為顯著;同時,隨著分辨率的,使得質(zhì)量準(zhǔn)確度也得到進(jìn)一步;尤其值得關(guān)注的是,隨著分辨率的,質(zhì)譜檢測靈敏度沒有任何損失;
• 6530 QTOFMS的ADC所配備的數(shù)字電路的數(shù)送速度可32 gigabit/sec,從而了質(zhì)譜系統(tǒng)進(jìn)行快速采樣的需求;現(xiàn)代液相色譜技術(shù)已趨于分離度更高,分離時間更短,相應(yīng)得到的色譜峰寬也越來越窄,通常情況下,由亞2微米色譜柱及納流芯片液相色譜獲得的色譜基線峰寬只有0.5~10s,因此,與之聯(lián)機(jī)的質(zhì)譜系統(tǒng)的采樣速率就成為獲得高質(zhì)量圖譜的關(guān)鍵。6530 QTOFMS可20 spectra/sec,以及10 MS/MS spectra/sec 的采樣速率,與快速液相分離匹配。
4. 靈活、廣泛的應(yīng)用
6530 QTOFMS除了可以配置流離子聚焦離子源和芯片液相色譜,還可以和安捷倫的其它多種離子源配合使用,滿足多領(lǐng)域、多用途的需求。
軟件特點(diǎn):
一臺好的儀器,還需要通過的軟件系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)采集、數(shù)據(jù)分析等實(shí)際操作,從而完成儀器本身所具備的各項(xiàng)功能。安捷倫6530 QTOFMS配備了增強(qiáng)版的MHunter Workstation,針對QTOFMS 的應(yīng)用,MHunter Workstation所具有的特色功能,及其優(yōu)勢列表如下:
特色功能 優(yōu)勢
MS/MS 的數(shù)據(jù)采集:
• 動態(tài)調(diào)節(jié) MS/MS采集時間
• 包括/排除離子 在有限的出峰時間內(nèi),可對更多的前體離子采集二
級質(zhì)譜,并且有針對性地選擇前體離子;有助于獲得高質(zhì)量的低豐度前體離子的二級質(zhì)譜;
有利于對小分子化合物的鑒別,蛋白組學(xué)研究中的序列覆蓋率。
分子特征提取功能(molecular feature
extraction, MFE):
• 從原始數(shù)據(jù)中自動識別并扣除化學(xué)噪音
• 將來源于同一個化合物的質(zhì)譜信號(同位素、
加合離子、多價離子、多聚體等)及保留時間和信號強(qiáng)度整合為一個數(shù)據(jù) 從復(fù)雜背景中,提取整合出的信號;
從數(shù)據(jù)分析的角度,檢測靈敏度;
快速、地發(fā)現(xiàn)目標(biāo)成分,分析數(shù)據(jù)的質(zhì)量;
尤其有利于從復(fù)雜基質(zhì)中檢定微量化合物,包括大分子和小分子物質(zhì)。
分子式計(jì)算:
• 同位素比例的計(jì)算和評分
• 基于質(zhì)量虧損(M Defect)的數(shù)據(jù)過濾和評分
• 加合離子信號參與對分子式的評分
• 碎片離子的分子式計(jì)算
• 中性丟失的分子式計(jì)算
• 分子式自動確認(rèn)
• 數(shù)據(jù)庫檢索 根據(jù)同位素質(zhì)量準(zhǔn)確度和同位素比值的計(jì)算結(jié)果,進(jìn)一步對分子式的確認(rèn)度;
根據(jù)質(zhì)量虧損范圍,分子式確認(rèn)的針對性;
加合離子信號的準(zhǔn)確度參與分子式評分,增加確認(rèn)度;
提供碎片離子和中性丟失的分子式,可以幫助進(jìn)一步確認(rèn)化合物分子式,同時也提供更多的結(jié)構(gòu)分析信息;
分子式自動確認(rèn)功能可幫助用戶從復(fù)雜基質(zhì)中,快速篩查、確認(rèn)目標(biāo)化合物;
數(shù)據(jù)庫檢索幫助用戶更加快速地鑒別樣品中可能存在的化合物。
多種數(shù)據(jù)輸出格式:
MGF (Mascot), JCAMP, MZxml, and MZml. Compound summary csv 便于用戶使用其它軟件,進(jìn)行更專門的數(shù)據(jù)計(jì)算或比對 。
定量方法開發(fā)功能 用戶可采用MS 和 MS/MS建立定量分析方法,快速、簡便,工作效率 。
多種附加應(yīng)用軟件
– Spectrum Mill MS Proteomics Workbench:蛋白組學(xué)研究不可少。
– Bioconfirmation software:生物大分子分析軟件。
– Metabolite Identification software:代謝物鑒定軟件,用于代謝物的發(fā)現(xiàn)和鑒定。
– M Profiling software and Genespring MS software: 質(zhì)譜數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件,用于生物標(biāo)記物(Biomarker) 的發(fā)現(xiàn),代謝組學(xué)和蛋白組學(xué)研究的工具。
儀器介紹 融合了安捷倫公司新開發(fā)的流離子聚焦離子化技術(shù)和高四桿-飛行時間質(zhì)譜技術(shù)的安捷倫6530 QTOFMS,將質(zhì)譜檢測的準(zhǔn)確度、靈敏度、分辨率、譜內(nèi)動態(tài)范圍和掃描速度都到了業(yè)界同類儀器的新高度,業(yè)已成為世界上質(zhì)量準(zhǔn)確度,靈敏度的四桿-飛行時間質(zhì)譜儀。廣泛應(yīng)用于蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、食品、環(huán)境分析、雜質(zhì)分析、代謝物鑒定等多個領(lǐng)域。