一、儀器開/關(guān)機(jī)程序

1、開機(jī)程序

1.1 打開電腦，進(jìn)入桌面。

1.2 打開icycler PCR儀器的電源開關(guān)（注：該儀器有兩個(gè)電源開關(guān)，一個(gè)控制PCR儀，一個(gè)控制光源系統(tǒng)）。

1.3 雙擊桌面上的軟件圖標(biāo)，點(diǎn)擊“yes”,進(jìn)入軟件的主菜單。

2、關(guān)機(jī)程序

2.1 保存數(shù)據(jù)，退出軟件的主菜單。

2.2 關(guān)掉電腦，關(guān)閉icycler PCR儀器的電源開關(guān)。

二、程序文件的設(shè)置及打開

1、 實(shí)驗(yàn)程序已預(yù)先設(shè)定

1.1 點(diǎn)擊軟件左方主目錄中的“Library”，進(jìn)入該界面后。

1.2 選擇“View Protocol”頁面，根據(jù)路徑，找到預(yù)存的程序文件。

2、 創(chuàng)建新的程序文件

2.1 點(diǎn)擊軟件左方主目錄中的“Workshop”，進(jìn)入該界面。

2.2 選擇“Edit Protocol”頁面，輸入相應(yīng)的溫度、時(shí)間、重復(fù)的循環(huán)數(shù)（Repeats），增加或刪除步驟（Cycle和Step），在“Select data collection step（s）”中選擇需要進(jìn)行熒光收集的步驟。

2.3 完成后，在“Protocol Filename”中輸入程序的文件名，點(diǎn)擊“Save this protocol”。

三、儀器操作程序

1、編輯樣本

1.1 將裝有反應(yīng)液的PCR反應(yīng)管放入PCR儀，記錄樣本擺放順序。

1.2 點(diǎn)擊進(jìn)入軟件左方主目錄的“Workshop”界面，選擇“Edit Plate Setup”頁面。

1.3點(diǎn)擊“Samples：Whole Plate loading”，根據(jù)樣本擺放的順序和樣本屬性，選擇相應(yīng)的圖標(biāo)（Unknown和Standard），在plate上相應(yīng)位置作標(biāo)識(shí)，是標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）的，在屏幕右下方的“Standard Quantity”中輸入相應(yīng)濃度。

1.4點(diǎn)擊“Select and load fluorophores”，在“1. or deselect a fluorophore”中選擇熒光標(biāo)記，在“2.Assign a color”中選擇該標(biāo)記相對(duì)應(yīng)的顏色，然后在plate上對(duì) 1.3所選擇的孔位進(jìn)行熒光標(biāo)記。

1.5 完成后，在“Plate Setup Filename：”中輸入樣本文件的文件名，點(diǎn)擊“Save this plate setup”。