赭曲霉毒素ELISA檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品名稱：赭曲霉毒素試劑盒

產(chǎn)品概述：赭曲霉毒素A是由曲霉菌和青霉屬菌株產(chǎn)生的一種有毒真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物，廣泛存在于谷物及谷物產(chǎn)品、香料和咖啡豆等產(chǎn)品中。赭曲霉毒素A具有很強(qiáng)的肝臟和腎臟毒性，并有致畸、致突變和致癌作用，嚴(yán)重危害人類健康。赭曲霉毒素一般用薄層色譜、高效液相色譜法檢測(cè),但因其操作繁雜、費(fèi)用昂貴而影響實(shí)際應(yīng)用。而使用赭曲霉毒素ELISA試劑盒則能夠快速而準(zhǔn)確的分析樣品中赭曲霉殘留。

適用范圍

赭曲霉檢測(cè)試劑盒可定性、定量檢測(cè)谷物、飼料、面粉、啤酒、紅酒、飲料等樣本中的赭曲霉毒素。

試驗(yàn)原理

赭曲霉毒素試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被赭曲霉毒素A抗原，加入樣本及辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的赭曲霉毒素A 抗體。樣本或標(biāo)準(zhǔn)溶液中的赭曲霉毒素A與預(yù)包被在微孔板上的赭曲霉毒素A抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的赭曲霉毒素A 抗體，與樣本或標(biāo)準(zhǔn)溶液中的赭曲霉毒素A結(jié)合的酶標(biāo)抗體在洗滌時(shí)被除去，再加入顯色液，讀取吸光度值。樣本的吸光值與其所含殘留物赭曲霉毒素A抗原的含量成負(fù)相關(guān)。對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可得出相應(yīng)殘留物赭曲霉毒素A的含量。

試劑配制

1、將赭曲霉毒素試劑盒取出放置在室溫中，使試劑盒回溫至室溫（20～25℃）。

2、 樣品稀釋液：用去離子水將濃縮樣品稀釋液按1:9體積比進(jìn)行稀釋（1份濃縮樣品稀釋液+9份去離子水）。2－8℃保存三個(gè)月。用前混勻。

3、 10倍稀釋洗滌工作液：用去離子水將濃縮洗滌液按1:9體積比進(jìn)行稀釋（1份濃縮洗滌液+9份去離子水），2－8℃保存三個(gè)月。用前混勻。

操作步驟

1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20～25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。

2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔板放進(jìn)原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于2～8℃。不要冷凍。

3、洗滌工作液在使用前也需回溫。

4、編號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本：加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50ul/孔到對(duì)應(yīng)的微孔中，再加入酶標(biāo)物50ul/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境中反應(yīng)15min。

6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌工作液300ul/孔，充分洗滌5次，每次間隔30s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破）。

7、顯色：加入底物液100ul/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境反應(yīng)15min。

8、測(cè)定：加入終止液50ul/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處測(cè)定每孔OD值。

注意事項(xiàng)

1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20～25℃）會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。

2、在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

3、每加一種試劑前需將其搖勻。

4、反應(yīng)終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。

5、不要使用過(guò)了有效日期的試劑盒；也不要使用過(guò)了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過(guò)了有效期的試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。

6、儲(chǔ)存條件

   保存赭曲霉毒素試劑盒于2～8℃，不要冷凍，將不用的酶標(biāo)板微孔板放進(jìn)自封袋重新密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的發(fā)色劑對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。

7、試劑變質(zhì)的跡象

發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。

8、赭曲霉毒素試劑盒反應(yīng)溫度為25℃，溫度過(guò)高或過(guò)低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

試劑盒組成

1、96孔酶標(biāo)板×1塊 

2、標(biāo)準(zhǔn)液×6瓶：（1ml/瓶） 

0ppb, 1ppb, 2ppb, 6ppb, 18ppb,54ppb

3、酶標(biāo)物 1瓶  …………………………………………… 6ml

4、顯色液1瓶    ………………………………………  12ml 

5、終止液      ………………………………………6ml

6、濃縮洗滌液 （10×） ………………………………… 40ml

7、濃縮樣品稀釋液（10×） ……………………………… 20ml

8、操作說(shuō)明書

貯藏條件及保存期

        貯藏條件：保存試劑盒于2～8℃。

保存期：赭曲霉毒素試劑盒有效期為12個(gè)月。

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