*擦去蔬菜表面泥土,滴3~4滴浸提液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。
*取一片速測卡,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。
*放置10分鐘進行預(yù)反應(yīng),將速測卡對折(紅色藥片與白色藥片疊合),用手捏3分鐘,打開速測卡,與同時操作的空白對照速測卡(白色藥片上只加浸提液的速測卡)比較,白色藥片不變色或略有淺藍色均為陽性結(jié)果。
*白色藥片變?yōu)樘焖{色或與空白對照卡相同,為陰性結(jié)果。
*有條件時,將紙片插入“農(nóng)藥殘毒速測儀”自動恒溫、定時檢測,可做10個樣品。
【蔬菜整體測定法】
*選取有代表性的蔬菜樣品,擦去表面泥土,剪成1cm左右見方碎片,取5g放入帶蓋瓶中,加入10mL浸提液(樣品與浸提液的比例為1﹕2),震搖50次,靜置2分鐘以上。取澄清液2~3滴于速測卡白色藥片上,放置10min進行預(yù)反應(yīng),以下操作和觀察結(jié)果與1法相同。
*有條件時,可將提取瓶(罐)放入超聲波清洗器(震蕩器)中震蕩30秒代替震搖50次。
【農(nóng)藥投毒可疑物及中毒殘留物的測定】
*取可疑物或中毒殘留物適量,加2倍量的磷酸鹽浸提液,震搖、靜置、過濾或離心分離得到澄清液;
*如果得不到澄清液,將磷酸鹽浸提液改為乙酸乙酯,震搖、靜置,取澄清液于蒸發(fā)皿中,水浴蒸干乙酸乙酯,取1~2ml磷酸鹽浸提液溶解蒸干后的殘渣,取溶液2~3滴于速測卡白色藥片上,以下 操作和觀察結(jié)果與1法相同。
【干擾物質(zhì)與排除方法】
*目前國內(nèi)外所使用的農(nóng)藥殘毒測定方法(紙片法和分光光度法)的檢驗原理基本相同,測定中的干擾物質(zhì)也基本相同。
*蔥、蒜、蘿卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。
*處理這類樣品時(包括葉綠素較多的樣品),可采取整株或整片蔬菜浸提的方法或采取表面測定法,減少干擾因素。
*有機溶劑對測定有干擾,如果采用乙酸乙酯提取農(nóng)藥,提取后必須蒸干。
*酶測試法不適用加工后的茶葉,適用于從茶樹上采摘下來的嫩葉。
【使用注意事項】
*當溫度條件低于37°C,酶反應(yīng)的速度隨之放慢,速測卡加液后放置反應(yīng)的時間應(yīng)相對延長,延長時間的確定,應(yīng)以空白對照卡用(體溫)手指捏3分鐘時可以變藍,即可往下操作。樣品放置的時間應(yīng)與空白對照卡放置的時間一致才有可比性。
*紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)的時間以3分鐘為準,3分鐘后的藍色會逐漸加深,24小時后顏色會逐漸退去。
*空白對照卡不變色的原因,一是藥片表面浸提液加的少、預(yù)反應(yīng)后的藥片表面不夠濕潤,二是溫度太低。